在酶的發(fā)酵設(shè)計生產(chǎn)中,菌株的產(chǎn)酶性能是決定發(fā)酵效果的重要因素,但發(fā)酵條件也會影響細(xì)菌的生長和酶的產(chǎn)量。除了適宜的培養(yǎng)基外,酶的合成還需要適宜的溫度、pH、溶解氧等。各種參數(shù)相互影響,相互聯(lián)系,只有配合得當(dāng),才能取得預(yù)期的效果。
1、溫度:微生物的生長、繁殖和代謝都需要在適宜的溫度下進(jìn)行,不同的細(xì)菌有不同的適生長溫度。發(fā)酵設(shè)計過程中細(xì)胞產(chǎn)酸的理想溫度通常低于細(xì)胞的生長溫度,這是因為在較低的溫度下,可以提高酶的穩(wěn)定性,但溫度越低越好。選擇生長期適合細(xì)菌生長的溫度和產(chǎn)酶期適合產(chǎn)酶的溫度,在這樣的發(fā)酵條件下獲得的酶產(chǎn)量將是理想的。
2、pH:微生物的生長和代謝產(chǎn)物的合成不僅需要適宜的溫度,還需要適宜的pH,發(fā)酵對微生物細(xì)胞的生長和酶的合成有重要影響,在適宜的pH下酶的產(chǎn)量會增加幾倍甚至十幾倍,由于菌株的遺傳轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)基的成分、培養(yǎng)條件和營養(yǎng)物質(zhì)的分解代謝,發(fā)酵設(shè)計過程中的pH發(fā)生變化,發(fā)酵液的初始PH對發(fā)酵酶活性影響很大。
3、溶氧:微生物根據(jù)需氧量的不同分為好氧、厭氧和兼性厭氧微生物,而工業(yè)發(fā)酵所需的微生物大部分是好氧的,它們需要從周圍環(huán)境中不斷獲取氧氣。特別是在深層發(fā)酵中,溶解氧的控制是一個非常重要的參數(shù)。供氧不足會影響產(chǎn)酶量,但溶解氧濃度越高越好。不同的發(fā)酵階段需要不同的溶解氧濃度,發(fā)酵過程中有一些酶。然而,有些酶在發(fā)酵設(shè)計過程中對溶解氧的需求正好相反,這取決于菌株、酶的種類和培養(yǎng)基的成分等因素。
4、泡沫:發(fā)酵過程中,由于必要的通氣和攪拌,培養(yǎng)基成分的變化,發(fā)酵過程中氣體的產(chǎn)生,培養(yǎng)基中蛋白質(zhì)表面活性劑的存在等。泡沫將不可避免地產(chǎn)生,這將對發(fā)酵過程產(chǎn)生嚴(yán)重的負(fù)面影響,過多的泡沫會降低發(fā)酵罐的負(fù)荷系數(shù)。由于泡沫是氣體分散在少量液體中的膠體體系,會造成氣液不循環(huán),降低發(fā)酵過程中的氧傳遞效率。此外,如果泡沫過多,因此,泡沫控制是發(fā)酵設(shè)計過程中的重要內(nèi)容。
除上述條件外,攪拌、壓力、CO濃度和濕度都會影響發(fā)酵過程,它們也是發(fā)酵設(shè)計過程中的重要參數(shù)。在發(fā)酵過程中,還要防止雜菌的污染。發(fā)酵罐要消毒,接菌后要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作。發(fā)酵過程中應(yīng)及時取樣和鏡檢,防止雜菌污染。發(fā)酵是多種因素綜合作用的結(jié)果,在發(fā)酵過程中,需要探索獲得合理產(chǎn)酶量的理想條件。